miRNA-488对NSCLC恶性表型及顺铂耐药的机制研究

    近日，我所刘昭前课题组在《Scientific Reports》杂志上发表一篇名为“MiR-488 inhibits proliferation and cisplatin sensibility in non-small-cell lung cancer (NSCLC) cells by activating the eIF3a-mediated NER signaling pathway”。

   miRNA-488作为上游调控因子是否会引起eIF3a介导的肺癌细胞的肿瘤恶性表型的变化以及对顺铂药物的敏感性的影响？

本研究采用瞬时转染的方法过表达A549细胞中miRNA-488的水平。随后使用MTS方法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞周期，平板克隆、细胞划痕和Transwell小室实验检测A549细胞的恶性表型变化。同样在多种肺癌细胞系中进行miRNA-488及表达载体转染，使用顺铂处理转染后的细胞，运用MTS和流式细胞凋亡检测分析细胞对顺铂的反应性。使用荧光定量PCR检测mRNA的表达，western-blot检测蛋白的表达。

EiF3a在肺癌耐药的A549细胞中呈现低表达，而miRNA-488在A549亲本细胞中表达要高于耐药细胞。通过miRNA mimic转染A549细胞后我们发现miRNA-488对A549细胞克隆形成能力，细胞的增值，侵袭和迁移能力均具有明显的抑制作用。另外miRNA-488可以阻滞A549细胞停留在G1期，并且可以上调细胞周期相关蛋白P27。在A549、H1299和SK-MES-1细胞系中发现miRNA-488可以显著增加细胞对顺铂的抵抗性。Western-blot分析发现miRNA-488下调eIF3a后，引起核苷酸修复通路的XPC和RPA3蛋白表达升高。我们发现miRNA-488过表达可以抑制非小细胞肺癌细胞的增值、侵袭和迁移表型，可以认为miRNA-488发挥一种肿瘤抑制因子的作用。我们也发现miRNA-488可以通过eIF3a上调XPC及RPA14蛋白的表达增强核苷酸修复通路的活性从而增加非小细胞肺癌细胞对顺铂的抵抗。

原文链接:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28074905